Definitivamente fotografe no modo AV (valor de abertura) e varie a velocidade do obturador!
Você não deseja alterar a abertura entre as fotos, pois o efeito depende de quão bem as fotos se alinham; se uma foto foi tirada com uma abertura ampla, o primeiro plano / fundo pode ficar desfocado em uma foto e não em outra. Normalmente, focaria a imagem com antecedência e desligaria o AF para garantir que o foco seja idêntico em cada foto.
Um tripé é recomendado pelo mesmo motivo, no entanto, um bom software pode ser responsável por uma certa quantidade de movimento da câmera (especialmente para objetos distantes), mas não pode ser responsável por alterações no foco!
Seria interessante ver os efeitos dos resultados do uso da TV. Imagino que você tenha efeitos fantasmas estranhos nas áreas fora de foco, mas pode parecer interessante.